PRACTICA 6 ; 1º TRIMESTRE 4 de noviembre 2020

 1º TRIMESTRE

PRACTICA 6

TINCION DE GIEMSA

  • OBJETIVO

Diferenciar los distintos componentes celulares de una extensión sanguínea.

  • FUNDAMENTO  

La tinción de Giemsa es un método diferencial de tinción, que se utiliza para distinguir los distintos componentes celulares, atendiendo a la distinta afinidad hacia unos colorantes u otros.  

Esta tinción es de tipo ROMANOWSKY, es decir, que utiliza azul de metileno y sus productos de oxidación (azur A, B y C) como colorante básico y se combina con eosina, como colorante ácido. 

  • MATERL Y REACTIVOS 

 2 portas limpio 
 
Pipeta Pasteur 
 
Tubo de ensayo 
 
Gradilla 
 
Muestra de sangre 
 
Tubo de ensayo 
 
Cristalizador 
 
Puente de tinción


Frasco lavador


Microscopio


Colorante Giemsa


Agua destilada


Metanol


Aceite de inmersión


  • DESARROLLO

 1. Preparamos la muestra de sangre en el tubo de ensayo y lo colocamos en la gradilla. 

2. Con ayuda de una pipeta Pasteur, colocamos una gota de sangre en un extremo del porta y realizamos la extensión y dejamos que se seque. 

3. Antes de empezar vamos a ver en qué condiciones están los colorantes: si tienen precipitados o están mal. Si tienen precipitados o residuos se tienen que filtrar con un papel del filtro.

4. Colocamos el frotis sobre el puente de tinción y lo cubrimos con metanol durante tres minutos, para deshidratar la muestra y que se fije bien al porta.

5. En un tubo de ensayo preparamos la mezcla de tinción, que consiste en 0,2ml de Giemsa (azur-eosina-azul de metileno), con 2ml de solución tampón pH 7,2 (proporción 1:10). Con ayuda de una pipeta Pasteur, cubrimos la extensión con la tinción y la dejamos actuar durante 25 minutos.

6. Transcurrido el tiempo estimado, escurrimos el exceso de tinción y enjuagamos la muestra hasta que deje de salir tinte de ella. Hay que tener especial cuidado en no verter el chorro de agua directamente sobre la muestra, puede desprenderse.

7. Lavamos con agua destilada.

8. Dejamos escurrir en posición vertical hasta que se seque. 

9. Para la observación al microscopio, depositamos un cubreobjetos sobre la muestra. Ponemos una gota de aceite de inmersión y ya podemos observarlo con el objetivo 100x.

10. Al ver la tinción al microscopio los eritrocitos se ven de un color rosa-salmón y las plaquetas se ven muy pequeñas y de color violeta.  

  • RESULTADOS 

 

















 

  

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