DETERMINACION DEL FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA Rh ; 3º TRIMESTRE (ELENA) 1 de junio 2021

 3º TRIMESTRE

PRACTICA 32

DETERMINACION DEL FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA RH 

• OBJETIVO

 Determinar el fenotipo y genotipo de una persona.

•  FUNDAMENTO

El genotipo de una persona es su dotación genética en el cromosoma, y el fenotipo es la manifestación de ese genotipo.   

El fenotipo puede ser idéntico al genotipo. 
Dado que no existe el antígeno d, ni el anticuerpo Anti-d, es imposible determinar si el antígeno D es homocigoto o heterocigoto por su detección en los hematíes.   

El interés en la determinación del genotipo se debe a que existen casos de madres inmunizadas frente a D, y conviene conocer si el padre es o no homocigoto para D, antes de producirse un nuevo embarazo. Un padre homocigoto D, transmitirá el gen D a todos sus hijos, mientras que uno heterocigoto lo transmitirá con un 50% de probabilidades. 

El fenotipo se determina enfrentando los hematíes problema con los antisueros anti-D, anti-C, anti-E, anti-c y anti-e. El genotipo más probable dependerá de la raza o el grupo étnico.  

El genotipo del sistema Rh se enfrentan los hematíes problema a distintos antisueros dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh. La existencia o no de estos antígeno en la superficie de los hematíes, se detecta por una reacción de aglutinación. 

• MATERIALES Y REACTIVOS 

 Centrifuga 
Rotulador 
Vaso de precipitado 
Tubos de centrifuga 
Pipeta Pasteur 
Papel de filtro 
Gradilla
Suero Anti-D
Suero Anti-E 
Suero Anti-C 
Suero Anti-e 
Suero Anti-c
Solución salina fisiológica

Muestra de sangre 

• DESARROLLO   

 1. Preparamos todo el material y la zona de trabajo.   

2. Primero hacemos un lavado de hematíes, con 1 ml de sangre y 4 ml de solución salina al 0,9%, centrifugamos a 2000rpm 5minutos, cuando la centrifuga termine desechamos el sobrenadante con ayuda de una pipeta Pasteur. Este paso se repite mínimo 3 veces o hasta que el sobrenadante salga transparente.     

3. Terminado el lavado, suspendemos los hematíes al 5%, en otro tubo metemos 250 microlitros de hematíes, del botón que queda después de los lavados, junto con 4,750ml de solución salina y lo mezclamos con cuidado.    

4. De la suspensión al 5% , tenemos que verter 2 gotas en cada uno de los 5 tubos que contiene otras una gota  de los reactivos Anti-D, Anti-C, Anti-E, Anti-c y Anti-e, tapamos con parafina y los metemos a la centrifuga a 1000rpm 1 minuto.    

5. Cuando saquemos los tubos se vera cual ha aglutinado y cual no, comparándolo con la prueba de determinación del grupo sanguíneo en portaobjetos y ver si son los mismos resultados o no.

• RESULTADOS DEL PACIENTE 

 

Los reactivos Anti-D, Anti-C, Anti-E, Anti-c y Anti-e

 

Muestras de sangre y reactivos sin centrifugar, nuestro paciente es AB+

Muestras de sangre y reactivos ya centrifugadas y algunas aglutinadas. 

Los resultados son: Anti-D aglutinado, Anti-C aglutinado, Anti-E sin aglutinar, Anti-c sin aglutinar y Anti-e aglutinado. 

Estos resultados los tenemos que comparar con la tabla de fenotipos y genotipos del sistema Rh. Que es la siguiente: 

En este caso el genotipo posible del paciente seria: DCe/dce o bien DCe/dCe