HematologiaNayraP

 3º TRIMESTRE PRACTICA 24 ESTUDIO DE UN CONCENTRADO DE LEUCOCITOS.  OBJETIVO Obtener una muestra de la capa leucoplaquetaria, para su estudio al microscopio óptico.     FUNDAMENTO Para el estudio microscópico de células patológicas en una leucopenia.       Para obtener una muestra para pruebas citoquímicas   Para buscar corpúsculos de Baar.     Para la obtención de esta muestra, se suele centrifugar una muestra de sangre a una velocidad y durante un tiempo determinado.         La capa leucoplaquetaria o Buffy Coat, se quedaría en la zona media, con aspecto blanquecino y formada por plaquetas y leucocitos, que es lo que nosotros vamos buscando. MATERIAL Y REACTIVOS     Tubo de centrífuga     Centrífuga     Microscopio     Pipeta Pasteur  fina     Dos portas limpios   Frasco lavador con agua destilada     Tinción de panóptico rápido ...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 3-BIS INTRODUCCION AL MANEJO DEL MICROSCOPIO OBJETIVO Con esta práctica vamos a intentar reconocer y diferenciar a simple vista las diferentes partes de un microscopio óptico, así como su manejo.    Aprenderemos a enfocar con los diferentes objetivos, a utilizar el micro- y macrométrico, los tornillos reguladores de la platina, etc. FUNDAMENTO   La microscopía se usa para observar objetos o muestras de cualquier tejido o sustancia, que no pueden ser vistos a simple vista. Así, el microscopio dará una imagen aumentada de la muestra, que se le de.  En base a lo que se quiera analizar de la muestra, se definirán y planificarán los métodos a seguir, tales como:  MATERIAL Y REACTIVOS   Microscopio Papel Rotulador  DESARROLLO 1.  Descubrir el aumento de los oculares y de cada uno de los objetivos del m.o. 2. Recortar un trozo de papel cuadriculado, de manera que tenga la forma y el tamaño del portaobjetos. Dibujar en la porc...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 12 TINCION VITAL Y CONTAJE DE RETICULOCITOS OBJETIVOS   Identificar los reticulocitos presentes en una muestra de sangre, reconocer y observar su aspecto, y ver la relación entre la cantidad presente de estas células, con respecto a 2000 hematíes. FUNDAMENTO   Podemos observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción de azul de metileno nuevo o azul de cresil brillante.     En este caso la tinción es de células vivas, TINCIÓN VITAL.   Por ello 1º se va a teñir la sangre y después se va a hacer la extensión. Al extenderlas se produce la desecación de las células como único medio de fijación, para que no mueran; es decir no se va a utilizar fijador (metanol).   Lo que se va a estudiar es el grado de maduración del reticulocito: desde grado I a IV. Cuantos más retículos o restos de RNA menos maduros. También  se va a contar el nº de reticulocitos con respecto a hematíes . MATERIAL Y REACTIVOS     Mi...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 10 VISUALIZACION DE UNA CARAMA DE RECUENTO OBJETIVO Identificar las distintas partes de la cámara de recuento, la zona de trabajo y las diferenciaciones dentro del retículo central.   FUNDAMENTO   Los recuentos celulares pueden realizarse mediante métodos manuales (recuentos en cámara) o automáticos (recuentos en contadores electrónicos).     La primera opción, aunque es una técnica con un amplio margen de error y con mucha necesidad de tiempo invertido y elevado volumen de trabajo, es muy útil, pues los resultados obtenidos permiten la detección de alteraciones cuantitativas de las distintas células sanguíneas.   Vamos a utilizar la cámara Neubauer. MATERIAL Y REACTIVOS  Cámara de recuento Neubauer   Microscopio.   DESARROLLO    1 . Observar con el microscopio el retículo de la cámara de recuento.  2. Enfocamos con el objetivo 10x uno de los cuadrados grandes de los esquinas del retícul...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 9 TINCION PANOPTICO RAPIDO  OBJETIVO Visualizar algún tipo de leucocito en la preparación sanguínea, ya que con las tinciones anteriores no se han podido ver. FUNDAMENTO     También es una tinción diferencial. Se caracteriza por su gran rapidez de ejecución y por la peculiaridad de ser un método de inmersión.    El colorante, en vez de depositarse sobre la muestra, se encuentra en pequeños depósitos de tinción, donde se introduce el porta que contiene la muestra. MATERIAL Y REACTIVOS     Microscopio     Dos portas limpios   Sangre anticoagulada   Cubreobjetos     Frasco lavador     Solución 1: Alcohólica de triarilmetano     Solución 2: Tamponada de xanteno     Solución 3: Tamponada de tiazina     Aceite de inmersión DESARROLLO     1. Realización del frotis y lo dejamos secar.     2. Una vez la muestr...

 1º TRIMESTRE  PRACTICA 8 TINCION DE MAY-GRUNWALD-GIEMSA OBJETIVO  Observar cómo se ven las estructuras celulares con los distintos colorantes. FUNDAMENTO   Tinción de tipo Romanowsky, con el reactivo de May-Grunwald y el de Giemsa. MATERIAL Y REACTIVOS     Microscopio óptico.     2 Portaobjetos.   Pipeta Pasteur    Cristalizador.   Frasco lavador.     Puentes.     Reactivo de May Grunwald.     Reactivo de Giemsa. DESARROLLO   1.   Preparar un frotis sanguíneo de sangre capilar o anticoagulada (EDTA) y d ejar secar. 2. Colocar en los puentes la muestra. 3. Cubrir con May-Grunwald durante 1 minuto. 4. Añadir la misma cantidad de agua destilada y esperar 1 minuto. 5. Escurrir el líquido. 6. Cubrir con Giemsa durante 15 minutos. 7. Lavar con agua destilada y d ejar secar. 8. Observar al microscopio. RESULTADO      

 1º TRIMESTRE  PRACTICA 7 TINCION DE WRIGHT OBJETIVO Observar cómo se ven las estructuras celulares con los distintos colorantes. FUNDAMENTO   Este colorante se diferencia principalmente del de Giemsa,  en la presencia de metanol en su composición, por lo que nos ahorraremos el paso previo de fijación antes de teñir la muestra.   El colorante está compuesto de azul de metileno (que tiñe de color azul las partes ácidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas), disueltos en metanol (que permite la fijación de las células). MATERIAL Y REACTIVOS     Microscopio óptico    Tubo de ensayo    Pipeta Pasteur    Cristalizador    Puente de tinción   Frasco lavador    Dos portaobjetos limpios    Cubreobjetos    Muestra de sangre    Colorante Wright    Solución tampón pH 7,2   Aceite de inmersión  DESARROLLO     1. Realizamos un frotis...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 6 TINCION DE GIEMSA OBJETIVO Diferenciar los distintos componentes celulares de una extensión sanguínea. FUNDAMENTO     La tinción de Giemsa es un método diferencial de tinción, que se utiliza para distinguir los distintos componentes celulares, atendiendo a la distinta afinidad hacia unos colorantes u otros.     Esta tinción es de tipo ROMANOWSKY, es decir, que utiliza azul de metileno y sus productos de oxidación ( azur A, B y C ) como colorante básico y se combina con eosina, como colorante ácido.   MATERL Y REACTIVOS     2 portas limpio     Pipeta Pasteur     Tubo de ensayo     Gradilla     Muestra de sangre     Tubo de ensayo     Cristalizador     Puente de  tinción Frasco lavador Microscopio Colorante Giemsa Agua destilada Metanol Aceite de inmersión DESARROLLO  1.   Preparamos la muestra de sangre en el tubo de e...

 1º TRIMESTRE PRACTICA 5 PREPARACION Y OBSERVACION DE SANGRE EN FRESCO OBJETIVO El objetivo de esta práctica es la visualización de la estructura natural de las células sanguíneas sin ningún colorante.   FUNDAMENTO     Cuando no teñimos las células, evitamos posibles efectos secundarios de los colorantes sobre ellas, como la coagulación de las proteínas o la solubilización de hidratos de carbono y grasas.   Así podemos observar la estructura celular sin obtener problemas achacados al método de tinción.   MATERIAL Y REACTIVOS     Microscopio Portaobjetos Cubreobjetos Sangre anticoagulada Gradilla Tubos de ensayo Pipetas Pasteur  Vasos de precitado  Parafilm o tapones  Micropipetas  Puntas de micropipetas DESARROLLO    1. Hacemos un lavado de hematíes y una suspensión al 2%, de 2ml, entonces seria 60 ul de sangre y 1940ul de suero fisiológico. 2. Depositamos una gota de la suspensión encima del portaobjetos y lo c...