PRACTICA 1 ; 1º TRIMESTRE 7 de octubre 2020
1º TRIMESTRE
PRACTICA 1
METODICAS DEL LABORATORIO
- OBJETIVO
Aprender a utilizar y familiarizarse con los materiales básicos del laboratorio de hematología.
- FUNDAMENTO
Realizaremos un ejercicio de pesada, una distribución de volúmenes con los diferentes recipientes, preparación de muestras y disoluciones, centrifugación y manejo de las pipetas automáticas.
1) EJERCICIO DE PESADA:
- MATERIALES Y REACTIVOS
Papel de filtro
Balanza
Vidrio de reloj
Espátula
Pipeta de 10 ml
Agua destilada
Vasos de precipitado
Matraz
Pipeta Pasteur
Prepipeta pera
- DESARROLLO Y RESULTADOS
EJERCICIO 1:
Pesar en la balanza las siguientes cantidades: 10; 1,5; 6,2 gramos del preparado A, empleando como soporte un vidrio de reloj.
Deposita las cantidades en un pequeño trozo de papel de filtro y consérvalo en tu mesa.
EJERCICIO 2:
Comprueba el peso de las cantidades previamente pesadas por tu compañera de mesa y anota los resultados.
Mezcla las tres cantidades y anota el peso total.
10g=10g
6,2g=5,91g (fallo en el transporte)
1,5g=1,5g
Peso total: 17,7g=17,41g
EJERCICIO 3:
Pesa en la balanza las siguientes cantidades 245, 750 y 1400 mg del preparado B, utilizando como soporte papel de filtro.
Mezcla las tres cantidades y comprueba el peso total.
245mg=245mg
750mg=750mg
1400mg=1400mg
Peso total: 2395mg=2395mg
EJERCICIO 4:
Consigue mediante la balanza los siguientes volúmenes de Agua Destilada (AD): 20, 50 y 110 ml, empleando un vaso de precipitados.
Comprueba los volúmenes y anota los resultados.
Sabiendo que 1ml de agua destilada es 1g.
20ml=19,65g
50ml=49,40g
110ml=107,68g
2) DISTRIBUCION DE VOLUMENES:
- MATERIALES Y REACTIVOS
Pipetas de vidrio
Probetas
Embudos
Tubo de ensayo
Matraz Erlenmeyer
Vasos de precipitado
Micropipetas
Gradillas
Puntas de micropipeta
Prepipeta pera
- DESARROLLO Y RESULTADOS
Siguiendo el esquema del ejercicio anterior, se trata ahora de ejercitarnos en el empleo de material de vidrio volumétrico para el trasiego y distribución de volúmenes.
Cuando acabes, distribuye en los siguientes recipientes los volúmenes que te indico, anotando el procedimiento y material empleado para hacerlo.
En tubos de ensayo: 2,3 ml (con pipeta de vidrio y la Prepipeta pera), 150 ml (con micropipeta) y 0,002 L (con una micropipeta, son 200 ul).
En matraz Erlenmeyer: 150 ml, 28 ml (ambas medidas con una probeta, en el caso de que el matraz no sea de esas concentraciones y se pueda llenar entero en el caso de 150ml).
En vaso de precipitado: 65 ml. (con el mismo vaso de precipitado)
3) PREPARACON DE MEZCLAS Y DISOLUCIONES:
- MATERIAL Y REACTIVOS
Vasos de precipitado
Matraz aforado
Agua destilada
NaCl
Etanol al 96%
Acido sulfúrico H2SO4
Acido clorhídrico HCl
Pipeta Pasteur
- DESARROLLO Y RESULTADOS
En este ejercicio vamos a preparar diferentes mezclas y disoluciones. Es importante que tengamos clara la diferencia entre ambas y que a la hora de su preparación sigamos las normas indicadas.
A) 150 ml de Suero salino fisiológico (0,9%)
150ml * 0,9% /100ml = 1,35g de NaCl disueltos en 150 ml de agua destilada para hacer 150ml de suero salino fisiológico al 0,9%
B) 30 cc de solución de Etanol al 40% v/v
30ml* 40% /100ml= 12 ml de etanol al 96% y 18ml de agua destilada para hacer 30 ml de etanol al 40%
C) 125 ml de Acido sulfúrico 3 N
Peso molecular: 98,08
Valencia: 2
D= 1,84
Sabiendo que la N= gramos soluto * valencia/ volumen disolución * peso molecular
Solo hay que despejar los gramos de soluto, que es lo único que desconocemos y saldría así:
Gramos soluto= 3* 125* 98,08 / 2 y el resultado es: 18,389g soluto
Esto lo aplicamos a la formula de la densidad: V= 18,389g / 1,84 = 10,04ml de H2SO4
Por lo tanto, 10,04 ml de H2SO4 y 114,96ml de agua destilada para hacer 125ml de H2SO4 al 3N.
D) 225 ml de A. Clorhídrico 0,2 N
Peso molecular: 36,5
Valencia: 1
D= 1,12
Es exactamente igual que el apartado anterior, lo único que cambian son los números y el reactivo.
El resultado es: 1,46ml de HCl y 223,54ml de agua destilada para hacer 225ml de HCl al 0,2N.
4) CENTRIFUGACION:
- MATERIAL Y REACTIVOS
Centrifuga
Tubos de ensayo
Agua destilada
Arena
Carbón activo
Sulfuro de cobre
- DESARROLLO Y RESULTADOS
Manejo de la centrífuga para tubos de ensayo, y el principio de la del microhematocrito.
Practica la colocación de tubos, programación y manejo después del tutorial presentado por las compañeras de Aparataje.
Prepara la siguiente mezcla:
1)agua y carbón activo
2)agua y arena
3)agua y Sulfato de cobre
Centrifuga y observa los resultados.
1) se ve claramente el sobrenadante y el sedimento.
2) se ve claramente el sobrenadante y el sedimento.
3) no hay sedimentación en el tubo de ensayo.
5) MANEJO DE PIPETAS AUTOMATICAS:
- MATERIAL Y REACTIVOS
Micropipetas
Puntas de micropipetas
Agua destilada
Gradilla
Tubos de ensayo
- DESARROLLO Y RESULTADOS
Tras el tutorial de manejo de las pipetas automáticas, practica su empleo y uso con diferentes volúmenes, empleando siempre AD.
Distribuye en tubos de ensayo los siguientes volúmenes empleando una Pipeta de 200ul fija:
600 microL, = 600ul
800 microl, =800ul
1 ml = 1000ul
50 microL = 50ul
100 microL =100ul
200 microl = 200ul
75 microL = 75ul
125 microL = 125ul
Con una pipeta automática de diferentes volúmenes pesa los siguientes volúmenes de AD:
1ml = 1000ul
250 mirol = 250ul
50 microL = 50ul
Anota los resultados.
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