PRACTICA 20 ; 2º TRIMESTRE 24 de febrero

 2º TRIMESTRE

PRACTICA 20

ESTUDIO DE LAS ANEMIAS


1)PRUEBA DE LA SACAROSA: 

  • OBJETIVO 

Medir la concentración de sacarosa en sangre para averiguar si hay anemia.  

  • FUNDAMENTO  

Consiste en situar los hematíes en un medio de baja fuerza iónica, por lo que tienden a fijar el complemento, teniendo los hematíes, frente a este, una sensibilidad anormalmente alta. En este medio, los hematíes tienden a fijar el complemento y aquellos que son especialmente sensibles se lisan con facilidad. Prueba útil en el diagnóstico de alteraciones en la membrana eritrocitaria.

  • MATERIAL Y REACTIVOS 

Gradilla 
Cubetas 
Espectrofotómetro
Solución isotónica de sacarosa  
Pipetas Pasteur 
Tubos de hemolisis
Micropipetas
Puntas de micropipetas 

  • DESARROLLO

1. Hacer un lavado de hematíes (opcional, solo si la sangre esta muy hemolizada y tiene varios días)    
2. Centrifugar las muestras para separar el plasma de ellas. par ala siguiente practica, usando la sangre mas vieja para el tubo problema y la sangre mas nueva para el tubo control. 
3.  Preparar los reactivos a partir de esta tabla: 

 

Tubo  SF

Tubo S. CONTROL

Tubo S. PROBLEMA

Suero fisiológico: SF

1,8 ml

 

 

Solución de sacarosa (9,24 %)

 

1,8 ml

1,8 ml

Sangre Control: SC

 

0,2

 

Sangre Problema: SP

0,2

 

0,2


 4. Mezclarlo bien e incubarlo durante 30 minutos a temperatura ambiente.

5. Visualizar la hemolisis y luego por el espectrofotómetro.

6. Retiramos los sobrenadantes en cubetas para medirlas a 540 nm en el espectrofotómetro frente al tubo blanco SF.

7. Para dar los resultados hay que hacerlo mediante una formula en & de hemolisis= tubo problema  A*100/ tubo control A.

  • CALCULOS Y RESULTADOS

 Tubo SF: 2,977 A

Tubo control: 3,650 A

Tubo problema: 3,822 A


% hemolisis= 104,61%

Resultado negativo: cuando la descomposición de glóbulos rojos es menor de 5%

Resultado positivo: cuando la hemolisis es mayor de 10% 

Este resultado es positivo. 

El resultado es positivo en los pacientes con HPN (Hemoglobinuria paroxística nocturna)




  • CONCLUSION

Esta practica tenia otras dos partes, sin embargo, no pudimos acabar ninguna de ellas. 























 

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